关键词:
血府逐瘀汤
脑梗死
网络药理学
分子对接
凋亡
炎症
摘要:
目的:基于网络药理学和动物实验验证探讨血府逐瘀汤(XFZY)治疗脑梗死的作用机制。方法:基于网络药理学,利用多个数据库获取药物成分及其对应作用靶点、脑梗死相关疾病靶点;对药物靶点与疾病靶点取交集;构建“药物-成分-交集靶点”网络图;蛋白互作绘制药物疾病交集靶点PPI网络图,并筛选核心靶点;进行GO功能富集分析和KEGG信号通路富集分析;将筛选出来的关键靶点与主要成分进行分子对接,再将对接结合能较低的靶点-成分结果可视化。30只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药组(金纳多28 mg/kg)、XFZY低剂量组(0.9 g/kg)、XFZY高剂量组(3.6 g/kg),每组6只。除假手术组外,其余各组采用Longa线栓法制备大鼠脑中动脉缺血模型。假手术组、模型组大鼠灌胃给予生理盐水,其余各组给予对应药物,每日1次,连续72 h。造模72 h后取材,透射电镜观察脑组织超微结构;ELISA检测血清TNF-α、SOD水平;Western blot和qRT-PCR检测关键靶点蛋白和mRNA表达,初步验证网络药理学结果。结果:运用网络药理学方法筛选并收集到关键靶点为STAT3、AKT1、EGFR、PIK3CA、MAPK3等;富集关键条目与通路有AGE/RAGE、PI3K/Akt、HIF-1、RAS、Ca^(2+)、MAPK等;分子对接结果显示,XFZY的主要活性成分与STAT3、Bax、Bcl-2、EGFR等有较好结合能力;透射电镜结果表明,XFZY能降低细胞水肿,减少脑组织结构破坏;ELISA结果显示,XFZY能显著降低脑梗死大鼠血清中TNF-α水平,升高SOD水平;此外,XFZY能显著降低脑梗死大鼠脑组织中Bax表达和p-STAT3/STAT3比值,显著提高Bcl-2、LC3Ⅱ蛋白的表达,升高VEGF mRNA的表达。结论:血府逐瘀汤可能作用于STAT3、Bax、VEGF等核心靶点,通过抑制STAT3通路的激活,减少氧化应激和炎症反应,调控凋亡、自噬功能,有助于神经细胞修复,从而发挥抗脑梗死作用。