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关键词： 灵芝蜂胶胶囊   肝细胞癌   网络药理学   单细胞转录组   分子对接  

摘要： 目的采用网络药理学和单细胞转录组分析方法研究灵芝蜂胶胶囊抗肝细胞癌的潜在机制。方法利用TCMSP、本草组鉴(HERB)和SwissTargetPrediction数据平台,获得灵芝和蜂胶的活性成分及靶点。基于TCGA数据库获取肝癌RNAseq数据,运用R软件包DESeq2进行差异分析,将差异基因与药物靶点的交集基因作为灵芝蜂胶胶囊抗肝细胞癌的潜在靶点基因。采用R软件包clusterProfilter进行GO和KEGG富集分析。利用Cox和KM方法对交集靶点进行筛选,再使用GEO数据库中的GSE14520进行生存分析再次筛选得到核心基因。利用分子对接进行核心靶点基因和对应成分的模拟结合。采用GSE149614数据对核心基因进行单细胞分析,并对关键基因在多种癌症中的生存预后进行分析。采用qPCR验证灵芝蜂胶对HepG2和Huh7细胞的干预作用。结果基于网络药理学成功鉴定出肝细胞癌差异基因706个,灵芝蜂胶潜在作用靶点603个,二者交集靶点29个。富集分析结果主要涉及神经活性配体-受体相互作用和细胞周期等。满足生存分析筛选的关键靶点为AURKB、CCNA2、CCNB1、CCR3、CDK1、PLK1、TOP2A和TTK。分子对接结果表明这些关键基因与对应成分均具有良好的结合能力。qPCR结果显示灵芝蜂胶可显著抑制HepG2和Huh7细胞中AURKB基因的表达。结论灵芝蜂胶可能通过过氧麦角甾醇等成分作用于AURKB等基因参与细胞周期等过程发挥抗肝细胞癌的作用,为进一步研究提供思路和参考。

关键词： OBE教学理念   BOPPPS教学模式   药理学   课程思政   教学设计与实践  

摘要： 随着高等教育的持续改革和发展,对教学质量和教学模式的要求越来越高。围绕OBE理念下的BOPPPS教学模式,探讨“药理学”课程思政在这种教学模式下的设计与实践。将课堂教学过程分为课前、课中、课后三个模块,再细分为导入、目标、前测、参与式学习、后测和总结六个阶段,以OBE理念为指导,结合使用线上与线下的教学方式,以社会主义核心价值观教育、中华优秀传统文化的传承教育以及新时代的职业道德教育作为“药理学”课程思政的核心内容,巧妙地融入教学的各个环节之中。这样的教学设计,既能够培养学生知识的应用能力,也能够培养学生的道德情操和社会责任感,达到教书育人的双重目的。

关键词： 茶油   网络药理学   分子对接   抗炎   降血脂   免疫调节  

摘要： 为深入揭示茶油活性成分的作用机制及开发潜力,首先通过网络药理学方法系统预测了茶油活性成分的主要靶点及相关生物通路,从20种成分中筛选出5种核心活性成分:亚麻酸、4-羟基苯甲酸、表没食子儿茶素(EGCG)、谷甾醇和茶皂素。接着,采用分子对接技术模拟这5种成分与关键靶点蛋白的相互作用,分析其结合能力,以进一步理解茶油活性成分的生物学功能。随后,在细胞实验中选用EGCG、谷甾醇和茶皂素,通过LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞炎症模型和油酸诱导的HepG2脂质堆积模型,检测NO、TNF-α、IL-6等炎症因子及甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平,以验证这三种成分的抗炎和降血脂效果。结果表明,EGCG在200μM时对炎症因子和脂质堆积的抑制效果最显著,其次为谷甾醇和茶皂素。分子对接结果显示,EGCG通过氢键与主要抗炎及降血脂靶蛋白MAPK1结合,茶皂素与关键靶蛋白PPARG结合,β-谷甾醇则与靶蛋白HSP90AA1结合。综上所述,这3种活性成分在抗炎、降血脂及免疫调节方面展现出显著潜力,支持其作为茶油特色功能成分进一步开发应用。

关键词： 艾迪注射液   加权基因共表达网络分析   肝癌   网络药理学   分子对接  

摘要： 目的利用加权基因共表达网络分析(WGCNA)方法联合网络药理学方法及分子对接技术探讨艾迪注射液治疗肝细胞癌的分子机制。方法应用癌症基因组图谱(TCGA)数据库下载肝细胞癌组织样本和正常肝组织样本的蛋白表达数据,将蛋白质组数据整理成表达矩阵并通过加权基因共表达网络(WGCNA)构建共表达网络,然后将肿瘤组织中表达规律相似的基因划归到相同的基因模块中后,对基因模块与肿瘤组织进行相关性分析并找出与癌症相关性最强的基因模块。整理肝癌转录组数据并进行差异分析,筛选出在肿瘤组和对照组表达差异有统计学意义的基因。通过中药系统药理学技术平台(T-MSP)、PubChem及文献检索,筛选艾迪注射液的主要化学成分可能的作用靶点。将艾迪注射液的活性成分所对应的靶点基因和关键模块中的枢纽基因进行匹配,获得艾迪注射液可能的抗肝癌关键靶点。应用STRING数据库结合Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,并对网络进行拓扑学参数分析筛选关键靶点。利用基因本体功能(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析关键靶点的生物学功能,并利用AutoDock Vina软件进行分子对接验证。通过KM plotter分析关键基因与肝癌患者预后的关系。结果共筛选出378个样本和3775个基因进行WGCNA分析。筛选出艾迪注射液潜在抗肝癌靶点131个。艾迪注射液治疗肝癌的核心靶点为雌激素受体1(ESR1)、含杆状病毒IAP重复序列蛋白5(BIRC5)、细胞周期蛋白A2(CCNA2)、细胞周期检查点激酶(CHEK1),其潜在调控通路包括肿瘤通路、神经活性配体-受体相互作用、cGMP-PKG信号等通路。分子对接结果表明艾迪注射液的主要成分与核心靶点具有较强的结合活性。BIRC5、CCNA2、CHEK1的高表达和ESR1的低表达可能与肝癌患者的不良预后有关。结论艾迪注射液可通过多靶点、多途径发挥抗肝癌作用。

关键词： 乌药叶   UFLC-MS/MS   高脂血症   网络药理学   作用机制  

摘要： 目的采用UFLC-MS/MS技术分析乌药叶中化学成分,依据解析的化学成分结合网络药理学、分子对接技术和动物实验验证分析乌药叶防治高脂血症的主要活性成分、作用靶点及相关通路,初步探索其防治高脂血症的潜在作用机制。方法通过UFLC-MS/MS技术分析乌药叶中化学成分,采用网络药理学对高脂血症相关靶点进行预测,构建“化合物-疾病-靶点”网络。通过GO功能和KEGG分析,筛选出显著富集的通路(P<0.05)。对筛选出的活性成分与高脂血症关键靶点进行分子对接验证,最后采用动物实验和RT-PCR技术对乌药叶药效和抗高脂血症关键靶点进行实验验证。结果共分析鉴定32个化合物,其中包括8个生物碱类、16个黄酮类、8个内酯类化合物。网络药理学研究共筛选出活性成分13个,涉及相关基因靶点46个。基于GO和KEGG分析乌药叶降脂作用的潜在机制,主要涉及以下几条通路:流体剪应力与动脉粥样硬化信号通路、AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路、脂肪细胞因子信号通路等。动物实验表明,乌药叶醇提物2个剂量均可明显调节模型小鼠血脂、血糖和肝脏脂质水平;且RT-PCR结果显示其可明显上调肝脏组织中清道夫受体B类Ⅰ型(scavenger receptor class B typeⅠ,SR-BI)的表达,下调酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶(acyl-coenzyme A:cholesterol acyltransferase,ACAT)基因的表达。结论乌药叶具有改善高脂血症作用,其通过多成分、多靶点、多通路发挥效应,潜在活性成分排名前5的为槲皮素、山柰酚、四氢小檗碱、波尔定碱和四氢非洲防己碱,它们可能通过调节动脉粥样硬化、脂肪细胞因子等信号通路参与炎症反应、脂肪代谢、胰岛素抵抗和血管内皮功能等过程发挥降脂作用机制。

关键词： 蛇床子素   骨关节炎   软骨细胞   白细胞介素1β   炎症  

摘要： 目的:研究表明蛇床子素(osthole,OST)可以改善骨关节炎小鼠的软骨退化,但机制尚未充分阐明。本研究利用网络药理学和分子对接技术以及软骨细胞炎症损伤模型探讨OST改善骨关节炎软骨退化的机制。方法:从4个数据库中收集OST靶基因和膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)靶基因。通过UniProt数据库对获得的靶基因进行标准化转换,使用Venny工具获得了2个的交叉基因,并在STRING数据库中获得相应蛋白质的相互作用,随后通过Cytoscape软件筛选和可视化核心靶基因,并通过基因本体论(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析通路富集交叉基因预测OST作用的靶基因。再通过分子对接模型验证其结合可能,并可视化其结合结果。通过体外培养兔原代软骨细胞,利用白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)诱导软骨细胞炎症损伤模型。将细胞分为对照组、IL-1β、IL-1β+OST低(IL-1β+OSTL)、中(IL-1β+OST-M)、高(IL-1β+OST-H)剂量处理组及IL-1β塞来昔布处理(IL-1β+celecoxib)组;CCK-8法检测软骨细胞活力;Western blot及免疫荧光检测肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNFα)和基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)蛋白表达;RT-qPCR法检测IL-6、TNF-α和MMP-13 mRNA的表达。结果:80个OST靶点被鉴定为治疗KOA的潜在靶点,并筛选了10个核心靶基因胱天蛋白酶3(caspase-3,CASP3)、TNF-α、缺氧诱导因子1A(hypoxia inducible factor 1 subunit alpha,HIF1A)、IL-1β、核因子KB1(nuclear factor kappa B subunit1,NFKB1)、聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶1[poly(ADP-ribose)polymerase 1,PARP1]、NFE2样bZIP转录因子2(NFE2like bZIP transcription factor 2,NFE2L2)、Janus激酶2(Janus kinase 2,JAK2)、丝裂原活化蛋白激酶激酶1(mitogen-activated protein kinase 1,MAKP1)、糖原合酶激酶3b(glycogen synthase kinase 3 beta,GSK3B)。GO和KEGG分析进一步阐明了OST治疗KOA的分子机制,涉及多种信号通路。分子对接模拟证实了OST与IL-17信号通路中的TNF-α及IL-1β关键靶点稳定结合。兔软骨细胞实验证实,软骨细胞呈长梭型、铺路石样;2.5~40μmol/L的OST增加软骨细胞存活。与IL-1β处理组比较,OST抑制L-1β处理的软骨细胞表达IL-6、TNF-α和MMP-13,且OST低、中、高剂量OST抑制IL-6和TNF-α表达的效应与塞来昔布处理组比较无统计学差异,但塞来昔布不能抑制IL-1β诱导的MMP-13的表达。结论:OST可以促进软骨细胞的存活,抑制IL-1β处理的软骨细胞表达IL-6、TNF-α和MMP-13,从而减轻软骨细胞损伤。这些结果提示OST抑制软骨细胞炎症反应和MMP的表达可能是其改善关节炎的分子机制。

关键词： 《药理学》   课程思政   思政元素   专业必修课程  

摘要： 药理学是药学的专业基础课,是研究药物与机体之间相互作用规律的一门学科。课程思政是近年来高校教育改革的新方向,在此背景下,作为国家一流专业的药学中的药理学课程也需要因时而进、因势而新。综合该门课的课程特点,可以挖掘的思政元素有很多,在传授知识的同时引导学生树立正确的世界观、人生观和价值观,真正实现价值引领与知识传授的有机融合;探讨思政育人的必要性,探究思政元素融入课堂教学的实现路径和改革效果,以期实现专业教学和思政教育的相辅相成。*通讯作者。Pharmacology is a basic course of pharmacy, which studies the interaction between drugs and the body. Course ideological and political education is a new direction of higher education reform in recent years. In this context, pharmacology courses in pharmacy, as a national first-class major, also need to be updated with the times and trends. Based on the characteristics of this course, there are many ideological and political elements that can be explored. While imparting knowledge, it guides students to establish correct worldviews, outlooks on life, and values, truly achieving the organic integration of value guidance and knowledge imparting;exploring the necessity of ideological and political education, and the implementation path and reform effect of integrating ideological and political elements into classroom teaching, in order to achieve a seamless integration of professional teaching and ideological and political education.

关键词： 天麻   原发性高血压   降血压   网络药理学  

摘要： 目的通过网络药理学探究天麻在降血压方面的潜在机制。方法从Disgenet和GeneCards数据库获取原发性高血压的靶点,天麻成分的靶点来自BATMAN-TCM数据库;通过筛选疾病靶点和药物成分靶点的交集,确定候选“药物-疾病”靶点;利用ExpressAnalyst网站进行基因本体富集分析,并采用WebGestalt进行京都基因与基因组百科全书富集分析,筛选前10位信号通路。使用STRING数据库构建蛋白质相互作用网络,并通过Cytohubba筛选前10个关键靶点。借助Cytoscape软件构建“药物-成分-靶点-疾病”和“成分-靶点-通路”网络图。结果共筛选出原发性高血压的疾病靶点207个,筛选出天麻的活性成分14种,其中8种成分能调控原发性高血压的27个疾病靶点。这些靶点主要富集在昼夜节律、血管收缩、细胞钙离子稳态、节律性等生物进程中;涉及的分子功能包括核受体活性、细胞因子活性和激素活性等;靶点分布的细胞组分主要为胞质外区域。信号通路包括长寿信号通路、恰加斯病信号通路、神经活性配体-受体互作信号通路、白细胞介素-17炎性信号通路等。天麻的主要活性成分,如4-羟基苄胺、北豆根碱、蔗糖、间羟基苯甲酸、γ-谷甾醇通过调控TNF、PPARG、INS、ADIPOQ、NFKB1、MMP9、SERPINE1、IFNG 8个关键靶点,影响前10个关键信号通路,从而调控原发性高血压。结论天麻作为一种传统中药降压机制,涉及了多成分、多靶点和多通路的网络调控。

关键词： 肉豆蔻   心肌缺血   治疗   网络药理学   分子对接   作用机制  

摘要： 目的采用网络药理学和分子对接探索蒙药肉豆蔻治疗心肌缺血(MI)的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库、PubChem、SwissTargetPrediction等数据库检索得到肉豆蔻的主要化学成分及作用靶点。人类基因组数据库、在线人类孟德尔遗传数据系统、药物靶点数据库获得与MI相关的蛋白靶点,使用微生信构建肉豆蔻活性成分-MI相交靶点网络,String数据库构建肉豆蔻蛋白质相互作用网络并进行可视化分析,DAVID数据库进行基因本体富集分析及京都基因与基因组百科全书通路分析,运用AutoDock Vina软件进行分子对接计算验证,Pymol软件将对接结果可视化,预测其作用机制。结果最终获得肉豆蔻9种药物活性成分的潜在靶点和与MI相关的195个相交靶点基因,AKT1、清蛋白、表皮生长因子受体、ESR1、SRC等可能是重要的治疗靶点。肉豆蔻在对抗MI中涵盖了细胞代谢调控、细胞死亡现象,如细胞凋亡及细胞周期的动态平衡等生物过程,可能通过调节包括FoxO信号通路、ErbB信号通路、TRP通道的炎症介质调节、磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路等治疗MI。分子对接结果显示,核心成分与核心靶点具有较好的结合能。结论肉豆蔻可能通过多成分、多靶点、多通路方式实现对MI损伤的有效干预与保护。

关键词： 双夏汤   抑郁症   网络药理学   低氧诱导因子-1α   cAMP反应元件结合蛋白   蛋白激酶B1   糖原合成酶激酶3β  

摘要： 目的基于网络药理学及动物实验,探讨双夏汤对于慢性不可预知温和应激刺激(CUMS)抑郁样大鼠行为的改善作用及分子机制。方法采用网络药理学方法收集双夏汤的活性成分和治疗抑郁症的潜在靶点,筛选核心网络靶点。通过动物实验对网络药理学结果进行实验验证,具体方法为连续3周通过CUMS建立大鼠抑郁样模型,给予双夏汤干预2周,给药结束后进行行为学测试,通过旷场实验、强迫游泳实验评估抑郁行为,ELISA法检测大鼠血清白细胞介素(IL)-6水平,蛋白免疫印迹法检测各组大鼠海马组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、cA MP反应元件结合蛋白(CREB)表达水平,及其p-蛋白激酶B1(Akt)、p-糖原合成酶激酶3β(GSK3B)蛋白表达水平。结果网络药理学分析获得245个双夏汤抗抑郁症的潜在靶点,蛋白相互作用(PPI)网络分析发现双夏汤可能通过调控GSK3B、Akt1、磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸肌醇-3-激酶(PIK3CA)等靶蛋白发挥抗抑郁作用,涉及神经活性配体与受体的相互作用、HIF-1等信号通路。与模型组比较,双夏汤组大鼠体质量明显上升,强迫游泳测试及旷场测试中大鼠不动时间明显缩短(P<0.05、0.001),血清IL-6水平明显下降(P<0.01),HIF-1α、CREB、p-Akt、p-GSK3B蛋白表达明显降低,GSK3B蛋白表达明显升高。结论双夏汤对于CUMS大鼠的抑郁样行为具有改善作用,其机制可能是通过Akt/GSK3B和HIF-1α/CREB信号通路调节机体昼夜节律及海马组织中葡萄糖稳态而改善海马神经元可塑性。