关键词:
人脐静脉内皮细胞
间质干细胞
骨桥蛋白
组织支架
骨再生
新生血管
生理学
摘要:
目的探讨负载SVVYGLR多肽的骨支架对血管生成和成骨分化的促进作用。方法将β-TCP支架(BK组)和负载SVVYGLR多肽的β-TCP支架(SV组)与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养,观察SVVYGLR多肽对HUVEC增殖与活力的影响。用BK组和SV组支架浸提液培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC),观察SVVYGLR多肽对BMSC促成骨分化的影响。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析HUVEC血管基因(VEGF、CD31)的mRNA表达水平以及BMSC中骨桥蛋白(OPN)、骨钙蛋白(OCN)、Runt相关转录因子2(Runx2)的mRNA表达水平。在SD大鼠皮下植入BK组和SV组支架6周,进行苏木精-伊红(HE)、Masson染色和OCN、CD31免疫组化分析,观察动物体内血管生成和成骨分化情况。结果共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)和扫描电子显微镜(SEM)观察结果显示,SV组HUVEC细胞增殖能力更强。碱性磷酸酶(ALP)染色及茜素红S(ARS)染色结果显示,SV组促成骨分化能力优于BK组,差异有统计学意义(P<0.05)。RT-qPCR分析结果显示,SV组成骨基因OPN、OCN和Runx2及血管生成基因VEGF和CD31的mRNA表达量高于BK组,差异均有统计学意义(P<0.05)。体内实验观察到SV组比BK组有更多的胶原纤维和更高的OCN、CD31蛋白表达。结论负载SVVYGLR多肽的骨支架可以促进细胞血管生成和成骨分化。